关键词:C9、补体成分9、重组蛋白、膜攻击复合体、补体终末途径、感染免疫、N-His、大肠杆菌表达
一、C9:分子结构与生物学功能
C9(ComplementComponent9)是由 C9 基因编码的血清糖蛋白,是补体系统终末成分,也是膜攻击复合体(MembraneAttackComplex,MAC)的成孔亚基。C9以单体形式(mC9)存在于血清中,分子量约63kDa。在补体激活过程中,C9与C5b-8中间复合物结合,形成C5b-9复合物,催化C9聚合生成C5b-p9(即膜攻击复合体MAC),在靶细胞膜上形成跨膜通道,导致靶细胞裂解。本产品为重组人C9蛋白(Gln22-His265),采用大肠杆菌表达系统,N端携带His标签,经纯化后获得高纯度蛋白。
C9的核心生理功能包括:
膜攻击复合体(MAC)组装:C9是MAC组装的最终步骤。在补体级联反应中,C5b-8复合物形成后,C9与之结合并发生构象变化,随后多个C9分子聚合形成环状孔道结构;
细胞裂解与病原体清除:C9聚合形成的MAC在靶细胞膜上形成跨膜孔道,导致细胞膜破裂和细胞溶解,是机体清除病原微生物(尤其是革兰氏阴性菌)的关键机制;
先天性与适应性免疫:C9作为补体系统的终末效应分子,在先天性和适应性免疫应答中发挥关键作用,通过形成膜孔道溶解靶细胞和病原体;
C9缺陷与感染易感性:C9基因突变导致补体成分C9缺乏症,是一种罕见的常染色体遗传病。C9缺陷患者易发生复发性细菌感染,尤其是脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌感染;
与Perforin的结构相似性:C9与细胞毒性T淋巴细胞的成孔蛋白Perforin在结构、免疫学和功能上具有相似性,两者均能聚合形成管状病变结构。
表达与分布:C9主要由肝细胞合成,以单体形式存在于血清中。重组C9蛋白可作为免疫原、WB/ELISA标准品用于基础与转化研究。
二、C9重组蛋白的科研核心价值
高质量重组C9蛋白在多领域研究中具有不可替代的应用价值:
补体系统与免疫学研究:用于研究膜攻击复合体的组装机制、C9聚合的分子调控、补体终末途径的激活与调控;
感染免疫与病原体清除研究:分析C9在革兰氏阴性菌杀伤中的作用机制,研究补体介导的细菌清除效率;
C9缺陷与遗传病研究:用于C9缺乏症的机制研究,探索C9基因突变对蛋白功能的影响及感染易感性的分子基础;
成孔蛋白结构与功能研究:C9作为成孔蛋白的代表,可用于研究成孔蛋白的构象变化、聚合机制及膜插入过程;
免疫检测标准品:可作为WesternBlot、ELISA的阳性对照或定量标准品,建立检测方法;
抗体筛选与免疫原:用于制备抗人C9单克隆/多克隆抗体,或作为免疫原进行动物免疫。
三、蛋白纯度与质检验证(SDS-PAGE)
本产品经SDS-PAGE验证,纯度>90%,满足大多数免疫检测及细胞生物学实验要求。代表性SDS-PAGE结果显示:在约30.14kDa位置出现单一主条带,与预测分子量一致,无明显降解或聚集条带。
https://www.antibodysystem.com/product/2851.html
图注:LaneM:分子量标记;Lane1:还原条件下RecombinantHumanC9Protein,N-His,可见清晰单一条带,纯度>90%。
四、高品质RecombinantHumanC9Protein,N-His核心参数与技术优势
核心产品参数
|
参数 |
详情 |
|
货号 |
YHC00501 |
|
表达系统 |
大肠杆菌(E.coli) |
|
种属 |
人(Homosapiens) |
|
蛋白长度 |
Gln22—His265 |
|
预测分子量 |
30.14kDa |
|
标签 |
N-His |
|
纯度 |
>90%(SDS-PAGE) |
|
内毒素水平 |
请咨询实验室获取信息 |
|
Accession |
P02748 |
|
应用 |
ELISA、免疫原(Immunogen)、SDS-PAGE、WB、生物活性测试(进行中) |
|
剂型 |
冻干粉 |
|
储存缓冲液 |
冻干前溶液:PBS(pH7.4),0.02%NLS,1mMEDTA,4%海藻糖,1%甘露醇 |
|
复溶方法 |
无菌水复溶配制储备液 |
|
运输条件 |
一般为冻干粉或冷冻液体,干冰/蓝冰运输 |
|
稳定性与储存 |
频繁使用:2-8℃;长期保存:-20至-80℃,自收货之日起12个月。避免反复冻融,使用手动除霜冰箱 |
技术优势
大肠杆菌表达系统:高产量、成本低、批间稳定性高,适合大规模制备;
N-His标签设计:His标签便于通过亲和层析进行高纯度纯化,同时兼容Ni-NTA亲和检测体系,便于蛋白的检测与追踪;
高纯度(>90%):经SDS-PAGE验证,非特异性背景低,满足ELISA、WB及免疫原制备等应用要求;
多应用场景:已验证可用于ELISA、免疫原、SDS-PAGE、WB,生物活性测试进行中;
优化冻干配方:含海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂,提高蛋白长期稳定性;PBS体系兼容多数下游实验。
FAQ(高频问题)
1.该重组蛋白的活性如何?是否适用于细胞培养?
目前生物活性测试正在进行中。如需最新活性数据,可联系技术支持获取。
2.如何复溶和保存?
打开管盖前短暂离心,加入无菌水复溶配制储备液。复溶后可分装冻存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。
3.N端的His标签会影响C9的功能吗?
His标签位于蛋白N端。若实验对标签敏感,可咨询技术支持。
4.可以用于WesternBlot的阳性对照吗?
可以。本品已验证适用于WB,使用抗C9抗体或抗His标签抗体均可检测。
5.该蛋白是否适合制备抗体?
可以。本品纯度>90%,可作为免疫原免疫动物(兔、小鼠等)制备多克隆或单克隆抗体。
6.本产品与天然C9的序列差异?
本产品为重组人C9片段(Gln22-His265),N端添加了His标签用于纯化和检测。
订购信息
|
产品名称 |
货号 |
规格 |
|
RecombinantHumanC9Protein,N-His |
YHC00501 |
100μg/1mg/更大规格 |
更多信息和产品购买请联系:
AntibodySystem亚洲独家授权合作伙伴,提供高品质重组蛋白、抗体、ELISA试剂盒与一站式实验解决方案。
注:如需内毒素检测服务、活性测试方案或大批量定制需求,请咨询技术支持。