关键词:TNF-alpha、肿瘤坏死因子、重组蛋白、炎症、免疫调控、细胞凋亡、N-His、哺乳动物表达
一、TNF-alpha:分子结构与生物学功能
TNF-alpha(Tumor Necrosis Factor-alpha)是由 TNF 基因编码的多功能促炎细胞因子,属于肿瘤坏死因子超家族成员。TNF-alpha 通过结合 TNF 受体 TNFR1 和 TNFR2,启动下游 NF-κB 通路、MAPK 级联反应以及 caspase 家族介导的细胞凋亡信号通路,广泛调控炎症反应、免疫应答、细胞增殖、分化和凋亡等生物学过程。本产品为重组人 TNF-alpha 蛋白(Val77-Leu233),采用哺乳动物细胞表达系统,N端携带 His 标签,经纯化后获得高纯度蛋白。
TNF-alpha 的核心生理功能包括:
炎症与免疫调控:TNF-alpha 是炎症反应的主要调节因子,可诱导 IL-1、IL-6、IL-8 等多种炎症因子的分泌,促进免疫细胞活化与募集,在感染防御和自身免疫性疾病中发挥关键作用;
细胞凋亡与增殖调控:TNF-alpha 通过 TNFR1 信号通路激活 caspase 家族介导的细胞凋亡和坏死性凋亡,同时对多种肿瘤细胞具有细胞毒性作用;
肿瘤生物学关联:TNF-alpha 因能诱导某些肿瘤的出血性坏死而得名,在肿瘤发生发展中呈现双重作用——既可抑制肿瘤生长,也可促进肿瘤侵袭和转移;
多种疾病关联:TNF-alpha 在感染性休克、类风湿性关节炎、炎症性肠病、银屑病等自身免疫性和炎症性疾病中起重要作用,是重要的临床治疗靶点。
表达与分布:TNF-alpha 主要由活化的单核细胞、巨噬细胞、T 细胞、B 细胞、脂肪细胞和成纤维细胞等多种细胞分泌。重组 TNF-alpha 蛋白可作为细胞培养添加剂、免疫原、WB/ELISA 标准品用于基础与转化研究。
二、TNF-alpha 重组蛋白的科研核心价值
高质量重组 TNF-alpha 蛋白在多领域研究中具有不可替代的应用价值:
炎症与免疫学研究:用于诱导多种细胞类型的炎症反应,研究免疫细胞活化、炎症信号通路及炎症因子调控网络;
细胞凋亡与细胞毒性研究:用于肿瘤细胞的凋亡诱导实验,研究 TNF-alpha 介导的细胞死亡信号通路;
肿瘤生物学研究:分析 TNF-alpha 对肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭的调控作用,探索肿瘤微环境中 TNF-alpha 的双重功能;
免疫检测标准品:可作为 Western Blot、ELISA 的阳性对照或定量标准品,建立检测方法;
抗体筛选与免疫原:用于制备抗人 TNF-alpha 单克隆/多克隆抗体,或作为免疫原进行动物免疫;
药物开发与活性测试:在细胞水平测试候选化合物对 TNF-alpha/TNFR 信号通路的调控作用,筛选 TNF-alpha 抑制剂。
三、蛋白纯度与质检验证(SDS-PAGE)
本产品经 SDS-PAGE 验证,纯度 > 90%,满足大多数免疫检测及细胞生物学实验要求。代表性 SDS-PAGE 结果显示:在约 18.58 kDa 位置出现单一主条带,与预测分子量一致,无明显降解或聚集条带。
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图注:Lane 1:分子量标记;Lane 2:还原条件下 Recombinant Human TNFa/TNF-alpha Protein, N-His,可见清晰单一条带,纯度>90%。
四、高品质 Recombinant Human TNFa/TNF-alpha Protein, N-His 核心参数与技术优势
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参数 |
详情 |
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货号 |
EHB94401 |
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表达系统 |
哺乳动物细胞 (Mammalian Cells) |
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种属 |
人 (Homo sapiens) |
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蛋白长度 |
Val77 — Leu233 |
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预测分子量 |
18.58 kDa |
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标签 |
N-His |
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纯度 |
> 90% (SDS-PAGE) |
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内毒素水平 |
请咨询实验室获取信息 |
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Accession |
P01375 |
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应用 |
ELISA、免疫原(Immunogen)、SDS-PAGE、WB、生物活性测试(进行中) |
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剂型 |
冻干粉 |
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储存缓冲液 |
冻干前溶液:PBS (pH 7.4),1mM EDTA,4% 海藻糖,1% 甘露醇 |
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复溶方法 |
无菌水复溶配制储备液 |
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运输条件 |
一般为冻干粉或冷冻液体,干冰/蓝冰运输 |
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稳定性与储存 |
频繁使用:2-8℃;长期保存:-20至-80℃,自收货之日起12个月。避免反复冻融,使用手动除霜冰箱。 |
核心产品参数
技术优势
哺乳动物细胞表达系统:更接近天然蛋白的翻译后修饰,有利于保持 TNF-alpha 的正确构象和生物活性;
N-His 标签设计:His 标签便于通过亲和层析进行高纯度纯化,同时兼容 Ni-NTA 亲和检测体系,便于蛋白的检测与追踪;
高纯度(>90%):经 SDS-PAGE 验证,非特异性背景低,满足 ELISA、WB 及免疫原制备等应用要求;
多应用场景:已验证可用于 ELISA、免疫原、SDS-PAGE、WB,生物活性测试进行中;
优化冻干配方:含海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂,提高蛋白长期稳定性;PBS 体系兼容多数下游实验。
FAQ(高频问题)
1. 该重组蛋白的活性如何?是否适用于细胞培养?
目前生物活性测试正在进行中。如需最新活性数据,可联系技术支持获取。
2. 如何复溶和保存?
打开管盖前短暂离心,加入无菌水复溶配制储备液。复溶后可分装冻存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。
3. N端的 His 标签会影响 TNF-alpha 的功能吗?
His 标签位于蛋白 N 端,通常不影响 TNF-alpha 与其受体的结合及下游信号传导。若实验对标签非常敏感,可咨询技术支持。
4. 可以用于 Western Blot 的阳性对照吗?
可以。本品已验证适用于 WB,使用抗 TNF-alpha 抗体或抗 His 标签抗体均可检测。
5. 该蛋白是否适合制备抗体?
可以。本品纯度>90%,可作为免疫原免疫动物(兔、小鼠等)制备多克隆或单克隆抗体。
6. 本产品与天然 TNF-alpha 的序列差异?
本产品为重组人 TNF-alpha 片段(Val77-Leu233),N 端添加了 His 标签用于纯化和检测。
订购信息
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产品名称 |
货号 |
规格 |
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Recombinant Human TNFa/TNF-alpha Protein, N-His |
EHB94401 |
100μg/1mg/更大规格 |
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AntibodySystem 亚洲独家授权合作伙伴,提供高品质重组蛋白、抗体、ELISA 试剂盒与一站式实验解决方案。
注:如需内毒素检测服务、活性测试方案或大批量定制需求,请咨询技术支持。